Dlx-3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405063

Descripción general

DLX3 codifica el factor de transcripción homeobox Dlx-3, un regulador de unión al ADN esencial para los programas de linaje derivados del ectodermo y de la cresta neural, incluidos la diferenciación epidérmica, la morfogénesis del folículo piloso, la odontogénesis y el desarrollo craneofacial. Dlx-3 modula redes transcripcionales que coordinan la especificación del destino celular, el patrón tisular y la diferenciación terminal, e interactúa con ejes de señalización del desarrollo más amplios, como los circuitos de regulación génica dependientes de BMP y Wnt. En la biología humana, la alteración de la función de DLX3 se asocia con defectos en los anexos ectodérmicos y en las estructuras craneofaciales, lo que refleja su papel en las interacciones epitelio-mesénquima. Como regulador transcripcional, Dlx-3 constituye un nodo manejable para estudiar el compromiso de linaje, la formación de barreras y los programas transcripcionales asociados a la diferenciación.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Dlx-3 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen DLX3 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del DLX3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de DLX3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Dlx-3.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en DLX3 para la investigación de la señalización de Dlx-3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de DLX3 críticos para la función de Dlx-3
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de DLX3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Dlx-3 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Dlx-3 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus DLX3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Dlx-3 (h) y el plásmido HDR Dlx-3 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología DLX3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana DLX3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.