Plásmido Doble Nickase (m) DLK2: sc-430660-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)DLK2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa DLK2 (m) y el plásmido de doble nickasa DLK2 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Dlk2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) DLK2 | sc-430660-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) DLK2 | sc-430660-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen Dlk2 de ratón codifica DLK2, una proteína transmembrana con repeticiones tipo EGF que pertenece a la familia Delta-like y está relacionada con los ligandos canónicos de Notch. DLK2 puede modular la salida de la vía Notch y, de este modo, influir en programas dependientes del contexto como las decisiones de destino celular, la diferenciación y la remodelación tisular. En contextos de desarrollo y homeostasis, la alteración de la actividad de DLK2 se ha vinculado a cambios en el mantenimiento de progenitores y en el compromiso de linaje, en consonancia con el diálogo cruzado entre la señalización de Notch y redes transcripcionales reguladas por factores de crecimiento. Dado que la desregulación de la vía Notch está ampliamente implicada en la señalización oncogénica y en las interacciones estroma–epitelio, Dlk2 se investiga con frecuencia como un nodo regulador en modelos de biología tumoral y del desarrollo.
DLK2 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Dlk2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Dlk2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Dlk2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Dlk2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.