DLK2 Plasmide Double Nickase (m): sc-430660-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- DLK2 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il DLK2 Double Nickase Plasmid (m) e il DLK2 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Dlk2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
DLK2 Plasmide Double Nickase (m) | sc-430660-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DLK2 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-430660-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino **Dlk2** codifica **DLK2**, una proteina transmembrana con ripetizioni di tipo EGF che appartiene alla famiglia Delta-like ed è imparentata con i ligandi canonici di Notch. DLK2 può modulare l’output della via di Notch e influenzare così programmi dipendenti dal contesto, come le decisioni di destino cellulare, la differenziazione e il rimodellamento tissutale. In contesti di sviluppo e omeostasi, un’alterata attività di DLK2 è stata associata a cambiamenti nel mantenimento dei progenitori e nell’impegno di linea, in accordo con un cross-talk tra la segnalazione Notch e reti trascrizionali regolate da fattori di crescita. Poiché la deregolazione della via di Notch è ampiamente implicata nella segnalazione oncogenica e nelle interazioni stroma–epitelio, **Dlk2** è spesso studiato come nodo regolatorio in modelli di biologia tumorale e dello sviluppo.
DLK2 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Dlk2 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Dlk2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Dlk2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Dlk2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.