Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
DLK2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406327
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- DLK2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico DLK2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: DLK2 Anticuerpo (B-10): sc-376896
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
DLK2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406327 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
DLK2 (ligando delta no canónico tipo Notch 2) codifica una proteína transmembrana con repeticiones tipo EGF que actúa como un ligando/modulador atípico de la señalización de Notch. En células humanas, DLK2 puede influir en programas de comunicación célula–célula que gobiernan el compromiso de linaje, la diferenciación y el patrón tisular, en intersección con vías que moldean estados progenitores y dinámicas epitelio–mesénquima. Se ha reportado una expresión alterada de DLK2 en múltiples contextos tumorales y modelos de biología del desarrollo, lo que respalda investigar su contribución al control de la proliferación, a fenotipos similares a células madre y a la señalización del microambiente. Por lo tanto, DLK2 es útil para dilucidar la regulación de la vía no canónica de Notch y las respuestas transcripcionales aguas abajo.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO DLK2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen DLK2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del DLK2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de DLK2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína DLK2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en DLK2 para la investigación de la señalización de DLK2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de DLK2 críticos para la función de DLK2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de DLK2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido DLK2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido DLK2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus DLK2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR DLK2 (h) y el plásmido HDR DLK2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología DLK2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana DLK2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.