非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
DinB 抗体 (A-9): sc-166667. F9 (A), MDA-MB-231 (B) 和 CCRF-CEM (C) 全细胞裂解液中 DinB 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
DinB双切口酶质粒(h): sc-405052-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- DinB 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- DinB双切酶质粒（h）和DinB双切酶质粒（h2）编码针对POLK的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：DinB: sc-166667，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
DinB双切口酶质粒(h) | sc-405052-NIC | 20 µg | $410.00 |
人类 POLK 基因编码 DNA 聚合酶 κ（DinB），属于 Y 家族跨损伤合成（translesion synthesis, TLS）聚合酶，能够在体积庞大的 DNA 加合物及其他损伤位点上继续进行复制，从而避免复制型聚合酶在这些位置停滞。POLK 参与 DNA 损伤耐受并维持复制叉前进，通过与增殖细胞核抗原（PCNA）相互作用，并参与由 ATR 介导的复制应激信号所协调的相关通路。其损伤旁路活性会影响突变谱与基因组稳定性，因此 POLK 功能失调与细胞对基因毒性应激的反应改变以及异常诱变相关。基于这些原因，POLK 常在 DNA 修复网络平衡、复制应激生物学以及决定体细胞突变累积机制等研究背景下被重点关注。
DinB 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 POLK 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对POLK内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏POLK的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了POLK基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。