DIEXF Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-411950

Descripción general

DIEXF codifica una proteína conservada asociada al ARN, implicada en la biogénesis ribosomal y la función nucleolar, que favorece el procesamiento y la maduración del ARNr precursor necesarios para una síntesis proteica eficiente. Al influir en el ensamblaje ribosomal y la capacidad de traducción, DIEXF contribuye a controles fundamentales del crecimiento celular, la progresión del ciclo celular y programas de expresión génica adaptativos al estrés. La alteración de factores de biogénesis ribosomal se asocia con frecuencia a inestabilidad genómica y proteostasis alterada, procesos que moldean los fenotipos celulares en trastornos del desarrollo y en contextos relacionados con el cáncer. En consecuencia, DIEXF se estudia como parte de las vías centrales del metabolismo del ARN que coordinan la homeostasis nucleolar con la proliferación y la diferenciación.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO DIEXF (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen DIEXF en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del DIEXF junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de DIEXF tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína DIEXF.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en DIEXF para la investigación de la señalización de DIEXF, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de DIEXF críticos para la función de DIEXF
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de DIEXF para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido DIEXF CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido DIEXF CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus DIEXF. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR DIEXF (h) y el plásmido HDR DIEXF (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología DIEXF para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana DIEXF definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.