DIEXF Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-411950

Visão geral

DIEXF codifica uma proteína conservada associada a RNA, implicada na biogênese dos ribossomos e na função nucleolar, apoiando o processamento e a maturação do pré-rRNA necessários para uma síntese proteica eficiente. Ao influenciar a montagem ribossomal e a capacidade translacional, DIEXF contribui para controles fundamentais do crescimento celular, da progressão do ciclo celular e de programas de expressão gênica adaptativos ao estresse. A perturbação de fatores de biogênese ribossomal é frequentemente associada à instabilidade genômica e à proteostase alterada, processos que moldam fenótipos celulares em contextos de distúrbios do desenvolvimento e câncer. Assim, DIEXF é estudado como parte de vias centrais do metabolismo de RNA que coordenam a homeostase nucleolar com proliferação e diferenciação.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO DIEXF (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene DIEXF em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do DIEXF, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do DIEXF na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína DIEXF.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de DIEXF para a investigação da sinalização de DIEXF, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) DIEXF críticos para a função DIEXF
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos DIEXF para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo DIEXF Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo DIEXF Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus DIEXF. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo DIEXF Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR DIEXF (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia DIEXF para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo DIEXF definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.