DGCR2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419995

Descripción general

Dgcr2 codifica DGCR2, una proteína transmembrana enriquecida en tejidos neurales en desarrollo e implicada en procesos que respaldan la diferenciación neuronal, la migración y la formación de circuitos. DGCR2 se localiza dentro de la región sinténica 22q11.2 y se estudia en el contexto de variaciones en el número de copias que influyen en fenotipos del neurodesarrollo y en la función sináptica. En modelos murinos, la perturbación de Dgcr2 se utiliza para investigar cómo los cambios en la señalización célula–célula y en el andamiaje asociado a la membrana contribuyen a las trayectorias del desarrollo cerebral. Estas características hacen que DGCR2 sea relevante para estudios mecanísticos de las vías que subyacen a la vulnerabilidad del neurodesarrollo y a cambios a nivel de sistemas en la conectividad neuronal.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO DGCR2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Dgcr2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Dgcr2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Dgcr2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína DGCR2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Dgcr2 para la investigación de la señalización de DGCR2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Dgcr2 críticos para la función de DGCR2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Dgcr2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido DGCR2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido DGCR2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Dgcr2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR DGCR2 (m) y el plásmido HDR DGCR2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Dgcr2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Dgcr2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.