Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Decorin Double Nickase Plasmid (h): sc-400786-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Decorin Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Decorin Double-Nickase-Plasmid (h) und Decorin Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf DCN abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Decorin: sc-73896
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Decorin Double Nickase Plasmid (h) | sc-400786-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Decorin Double Nickase Plasmid (h2) | sc-400786-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DCN kodiert Decorin, ein sezerniertes kleines leucinreiches Proteoglykan, das die Architektur der extrazellulären Matrix organisiert, indem es an Kollagene bindet und die Fibrillenassemblierung moduliert. Decorin reguliert außerdem die Signalübertragung von Wachstumsfaktoren, darunter TGF‑β, und beeinflusst damit SMAD-abhängige Transkription, Zelladhäsion und Migrationsprogramme, die den Gewebeumbau prägen. Über diese extrazellulären Wechselwirkungen wirkt sich DCN auf die Aktivierung von Fibroblasten, das angiogene Gleichgewicht und den entzündlichen Crosstalk in stromalen Mikroumgebungen aus. Eine veränderte DCN-Expression oder die Zusammensetzung des Decorin-Proteoglykans ist mit Fibrose, gestörter Wundheilung und der Tumor–Stroma-Dynamik assoziiert, was DCN zu einem nützlichen Ziel für mechanistische Studien zur Matrixsignalgebung macht.
Decorin Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des DCN-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von DCN abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die DCN-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit DCN-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.