Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide Double Nickase (m) DEC2: sc-429771-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) DEC2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide DEC2 Double Nickase (m) et le plasmide DEC2 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Bhlhe41. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) DEC2 | sc-429771-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) DEC2 | sc-429771-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin *Bhlhe41* code le facteur de transcription à domaine hélice–boucle–hélice basique (bHLH) DEC2, un régulateur contextuel de l’expression génique qui intègre la temporisation circadienne aux programmes de différenciation cellulaire. DEC2 participe à des réseaux transcriptionnels en aval de la machinerie centrale de l’horloge et module des processus tels que la régulation du cycle veille–sommeil, l’homéostasie métabolique et la répression/activation transcriptionnelle spécifique de lignée. Dans des contextes immunitaires et stromaux, BHLHE41/DEC2 a été associé au contrôle de programmes de cytokines et de réponses transcriptionnelles liées à l’hypoxie, le reliant à des voies qui façonnent l’inflammation et l’adaptation tissulaire. Une activité de DEC2 dérégulée a été associée à des phénotypes de sommeil altérés et a été étudiée dans des modèles d’états pathologiques métaboliques et immunitaires, où la transcription circadienne influence la fonction cellulaire.
DEC2 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Bhlhe41 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Bhlhe41. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Bhlhe41. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Bhlhe41.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.