Nicht CRISPR-Daten: Das Bild veranschaulicht die Qualität von Antikörpern zur Visualisierung von CRISPR-Experimentergebnissen.
Nicht CRISPR-Daten: Das Bild veranschaulicht die Qualität von Antikörpern zur Visualisierung von CRISPR-Experimentergebnissen.
DEC2 Double Nickase Plasmid (m): sc-429771-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das DEC2 Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- DEC2 Double-Nickase-Plasmid (m) und DEC2 Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Bhlhe41 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
DEC2 Double Nickase Plasmid (m) | sc-429771-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DEC2 Double Nickase Plasmid (m2) | sc-429771-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Das murine Gen **Bhlhe41** kodiert den basischen Helix-Loop-Helix-Transkriptionsfaktor **DEC2**, einen kontextabhängigen Regulator der Genexpression, der die zirkadiane Zeitgebung mit Programmen der zellulären Differenzierung verknüpft. DEC2 wirkt in transkriptionellen Netzwerken nachgeschaltet zur Kern-Uhr-Maschinerie und moduliert Prozesse wie die Schlaf-Wach-Regulation, die metabolische Homöostase sowie linienspezifische transkriptionelle Repression bzw. Aktivierung. In immunologischen und stromalen Kontexten wurde **BHLHE41/DEC2** mit der Kontrolle von Zytokinprogrammen und hypoxieassoziierten Transkriptionsantworten in Verbindung gebracht, wodurch es an Signalwegen beteiligt ist, die Entzündung und Gewebeadaptation prägen. Eine dysregulierte DEC2-Aktivität wurde mit veränderten Schlafphänotypen assoziiert und in Modellen metabolischer sowie immunbezogener Krankheitszustände untersucht, in denen zirkadiane Transkription die Zellfunktion beeinflusst.
DEC2 Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Bhlhe41-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Bhlhe41 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Bhlhe41-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Bhlhe41-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.