DDX37 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-412866

Descripción general

DHX37 codifica la helicasa de ARN humana dependiente de ATP DDX37, una proteína de la familia DEAD-box implicada en la biogénesis de ribosomas y el metabolismo del ARN. DDX37 participa en procesos nucleolares, incluido el procesamiento del pre-ARNr y la maduración de la subunidad ribosomal pequeña, favoreciendo una traducción eficiente y la progresión del ciclo celular. A través de sus funciones en la remodelación de complejos ribonucleoproteicos impulsada por helicasas de ARN, DDX37 se sitúa en vías que coordinan el procesamiento del ARN con programas proliferativos. La alteración genética o la desregulación de DHX37 se ha asociado con fenotipos del desarrollo y reproductivos, lo que lo hace relevante para estudiar la regulación génica específica de tejido y los mecanismos de enfermedad vinculados a un procesamiento del ARN deficiente.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO DDX37 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen DHX37 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del DHX37 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de DHX37 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína DDX37.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en DHX37 para la investigación de la señalización de DDX37, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de DHX37 críticos para la función de DDX37
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de DHX37 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido DDX37 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido DDX37 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus DHX37. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR DDX37 (h) y el plásmido HDR DDX37 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología DHX37 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana DHX37 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.