Plásmido Doble Nickase (h) DDX21: sc-405770-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)DDX21 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa DDX21 (h) y el plásmido de doble nickasa DDX21 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a DDX21. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: DDX21 Anticuerpo (D-8): sc-376953
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) DDX21 | sc-405770-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) DDX21 | sc-405770-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DDX21 codifica una helicasa de ARN tipo DEAD-box nucleolar que coordina la transcripción y el procesamiento del ARNr, la biogénesis de ribosomas y la organización nucleolar de orden superior. Mediante la remodelación dependiente de ATP de complejos ARN–proteína, DDX21 contribuye a la transcripción del ADN ribosomal (ADNr) impulsada por la ARN polimerasa I, a la maduración del pre-ARNr y al acoplamiento de la producción de ribosomas con los programas de crecimiento celular. DDX21 también se ha implicado en la regulación de la traducción de ARNm y en la señalización inmunitaria innata a través de interacciones con especies de ARN y ensamblajes de ribonucleoproteínas. La desregulación de la función nucleolar y de las vías de biogénesis ribosomal vinculadas a DDX21 se asocia con respuestas al estrés proliferativo y con programas de expresión génica alterados observados en múltiples contextos patológicos.
DDX21 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus DDX21 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de DDX21. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de DDX21. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con DDX21 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.