DDX21 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h2): sc-405770-KO-2
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- DDX21 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h2) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico DDX21, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: DDX21 Anticuerpo (D-8): sc-376953
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
DDX21 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h2) | sc-405770-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
DDX21 es una helicasa de ARN tipo DEAD-box localizada en el nucléolo que coordina el procesamiento de rRNA, la biogénesis ribosomal y, de forma más amplia, el metabolismo del ARN mediante la remodelación de complejos ARN–proteína. Participa en respuestas al estrés nucleolar y se integra con programas transcripcionales que acoplan las señales de crecimiento a la capacidad de síntesis proteica, influyendo en la progresión del ciclo celular y la proteostasis. DDX21 también se ha implicado en la señalización de la inmunidad innata al modular vías dependientes de ARN y la expresión de genes estimulados por interferón. La función desregulada de DDX21 y la biogénesis ribosomal alterada se estudian con frecuencia en el contexto de la transformación oncogénica, el estrés genómico y la biología de las infecciones virales.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO DDX21 (h2) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen DDX21 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del DDX21 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de DDX21 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína DDX21.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en DDX21 para la investigación de la señalización de DDX21, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de DDX21 críticos para la función de DDX21
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de DDX21 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido DDX21 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido DDX21 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus DDX21. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR DDX21 (h) y el plásmido HDR DDX21 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología DDX21 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana DDX21 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.