DDI1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-416011

개요

DDI1(DNA damage inducible 1 homolog)는 진화적으로 보존된 단백질을 암호화하며, 유비퀴틴-유사(ubiquitin-like) 도메인과 레트로바이러스 프로테아제 도메인과의 상동성을 바탕으로 단백질 항상성(proteostasis) 및 스트레스 반응에 관여하는 것으로 알려져 있습니다. 사람 세포에서 DDI1은 단백질 분해/턴오버와 유전독성 스트레스에 대한 세포 적응에 영향을 미치는 유비퀴틴 의존적 과정과 연관되어, 게놈 무결성 유지에 기여하는 것으로 보고되었습니다. 이러한 역할을 통해 DDI1은 DNA 손상 신호전달, 복제 관련 스트레스, 그리고 잘못 접히거나 손상된 단백질의 조절된 분해를 연결하는 경로에서 연구되고 있습니다. 단백질 항상성과 스트레스 반응 회로의 이상 조절은 종양성 전환 및 신경퇴행성 표현형의 맥락에서 자주 다뤄지므로, DDI1은 기전 연구를 위한 유용한 표적으로 여겨집니다.

DDI1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 DDI1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 DDI1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 DDI1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 DDI1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 DDI1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 DDI1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• DDI1 기능에 중요한 DDI1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 DDI1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• DDI1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 DDI1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 DDI1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  DDI1 HDR 플라스미드 (h) 및 DDI1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 DDI1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 DDI1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.