Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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DDB1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402067-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DDB1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DDB1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase DDB1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DDB1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DDB1 Anticorpo (E-11): sc-376860
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DDB1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402067-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DDB1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402067-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DDB1 (proteína 1 de ligação ao DNA específica de dano) é um adaptador central do complexo ligase E3 de ubiquitina CRL4 (CUL4–RBX1), que recruta diversos receptores de substrato para controlar a degradação proteica dependente de ubiquitina. Em células humanas, a DDB1 coordena vias de manutenção do genoma, incluindo o reparo por excisão de nucleotídeos, respostas ao estresse de replicação e controle de checkpoints, ao modular a estabilidade de fatores envolvidos no reconhecimento de danos ao DNA e na progressão do ciclo celular. Por meio dessas funções, a DDB1 ajuda a preservar a integridade da cromatina e a homeostase transcricional sob estresse genotóxico. A desregulação de redes de ubiquitinação ligadas à DDB1 tem sido associada a capacidade alterada de reparo do DNA e a fenótipos proliferativos relevantes para estudos de biologia do câncer e estabilidade genômica.
DDB1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DDB1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DDB1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DDB1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DDB1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.