Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) DAP12: sc-400916-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) DAP12 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide DAP12 Double Nickase (h) et le plasmide DAP12 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant TYROBP. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: DAP12 Antibody (G-5): sc-133174
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) DAP12 | sc-400916-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) DAP12 | sc-400916-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **TYROBP** code **DAP12** (également appelé TYROBP), un adaptateur transmembranaire qui couple la signalisation des immunorécepteurs à l’activation intracellulaire via son motif **ITAM**. DAP12 s’associe à des récepteurs tels que **TREM2**, **SIRPβ1** et divers **KIR** activateurs afin d’activer des voies **dépendantes de SYK** qui régulent la phagocytose, la production de cytokines, le remodelage du cytosquelette et la maturation des cellules de l’immunité innée. Il est fortement exprimé dans les cellules de la lignée myéloïde, notamment les macrophages, la microglie, les cellules dendritiques et les ostéoclastes, reliant des signaux extracellulaires à des programmes inflammatoires et d’homéostasie. Des altérations génétiques de la signalisation TYROBP–DAP12 ont été associées à des mécanismes de neuroinflammation et d’ostéo-immunologie, avec une pertinence pour des affections telles que la **maladie de Nasu–Hakola** et, plus largement, des contextes de dysfonctionnement microglial.
DAP12 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TYROBP dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TYROBP. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TYROBP. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TYROBP.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.