Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
DACH1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404712
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- DACH1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico DACH1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: DACH1 Anticuerpo (A-6): sc-398706
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
DACH1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404712 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
DACH1 (factor de transcripción 1 de la familia dachshund) es un regulador nuclear de unión al ADN implicado en decisiones de destino celular y en programas de diferenciación tisular, con funciones destacadas en la señalización del desarrollo. En células humanas, DACH1 modula redes transcripcionales vinculadas al control de la proliferación, el mantenimiento del linaje epitelial y la migración celular, incluidas interacciones cruzadas con la señalización de receptores hormonales y otros circuitos de factores de transcripción. La expresión o actividad reguladora alteradas de DACH1 se han asociado con cambios en fenotipos supresores de tumores, afectando procesos como la progresión del ciclo celular, la invasión y la expresión génica relacionada con la metástasis. Su función dependiente del contexto convierte a DACH1 en un nodo útil para estudiar el equilibrio entre represión/activación transcripcional y el reconfiguramiento de vías en modelos relevantes para enfermedades.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO DACH1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen DACH1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del DACH1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de DACH1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína DACH1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en DACH1 para la investigación de la señalización de DACH1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de DACH1 críticos para la función de DACH1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de DACH1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido DACH1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido DACH1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus DACH1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR DACH1 (h) y el plásmido HDR DACH1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología DACH1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana DACH1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.