Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) D4DR: sc-402947-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)D4DR consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa D4DR (h) y el plásmido de doble nickasa D4DR (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a DRD4. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: D4DR Anticuerpo (2B9): sc-136169
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) D4DR | sc-402947-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) D4DR | sc-402947-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DRD4 codifica el receptor dopaminérgico D4 (D4DR), un GPCR acoplado a Gi/o que modula la excitabilidad neuronal y la señalización sináptica al inhibir la adenilil ciclasa y ajustar las vías dependientes de cAMP/PKA. La señalización de D4DR se integra con MAPK/ERK y con la regulación de canales iónicos, influyendo en la liberación de neurotransmisores y en la plasticidad de los circuitos a nivel del sistema nervioso central. Las variaciones en DRD4 y la señalización alterada del receptor se han asociado con fenotipos neuropsiquiátricos y del neurodesarrollo, incluidos rasgos relacionados con la atención y el control de impulsos, y se estudian en el contexto de la desregulación de las vías dopaminérgicas. Como receptor de superficie celular con una farmacología bien caracterizada, D4DR constituye un nodo accesible para desentrañar la señalización dopaminérgica, el tráfico del receptor y las respuestas transcripcionales aguas abajo.
D4DR El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus DRD4 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de DRD4. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de DRD4. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con DRD4 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.