Cytokeratin 6A Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421354
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Cytokeratin 6A El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Cytokeratin 6A, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Cytokeratin 6A Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421354 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Krt6a codifica la citoqueratina 6A, una proteína de filamento intermedio tipo II que forma heterodímeros con queratinas tipo I para construir el citoesqueleto de queratina en epitelios estratificados. Se induce rápidamente durante la reparación de heridas, el estrés mecánico y la señalización inflamatoria, apoyando la migración y proliferación de queratinocitos y el refuerzo de la barrera. La citoqueratina 6A se integra en programas de remodelación del citoesqueleto y en la dinámica de las uniones celulares, influyendo en la integridad epitelial y la resiliencia tisular. La expresión alterada de Krt6a se asocia con estados epidérmicos hiperproliferativos y defectos de queratinización, lo que la hace relevante para estudios de la homeostasis cutánea y las respuestas al estrés epitelial en modelos murinos.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Cytokeratin 6A (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Krt6a en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Krt6a junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Krt6a tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Cytokeratin 6A.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Krt6a para la investigación de la señalización de Cytokeratin 6A, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Krt6a críticos para la función de Cytokeratin 6A
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Krt6a para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Cytokeratin 6A CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Cytokeratin 6A CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Krt6a. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Cytokeratin 6A (m) y el plásmido HDR Cytokeratin 6A (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Krt6a para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Krt6a definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.