CYTIP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-411299

Visão geral

CYTIP (proteína que interage com a citoesina-1) é um adaptador citoplasmático enriquecido em células imunes que modula a sinalização “inside-out” para integrinas e sustenta a adesão, a polarização e a migração de leucócitos. Ao se ligar à citoesina-1, o CYTIP pode influenciar o tráfego de membranas dependente de GTPases ARF e a remodelação do citoesqueleto de actina, conectando a sinalização desencadeada por receptores a alterações na motilidade celular e na organização da sinapse imune. O CYTIP está implicado em vias que regulam a ativação de células T e a função de células dendríticas, nas quais alterações de expressão podem modificar o recrutamento de células imunes e as respostas efetoras. A desregulação da sinalização associada ao CYTIP tem sido estudada no contexto de processos inflamatórios e de interações entre tumor e sistema imune, tornando-o relevante para a imunologia mecanística e para pesquisas sobre o microambiente tumoral no câncer.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CYTIP (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CYTIP em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CYTIP, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CYTIP na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CYTIP.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CYTIP para a investigação da sinalização de CYTIP, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CYTIP críticos para a função CYTIP
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CYTIP para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo CYTIP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo CYTIP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CYTIP. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo CYTIP Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR CYTIP (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CYTIP para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CYTIP definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.