CYTIP Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-411299

Descripción general

CYTIP (proteína que interactúa con citoesina-1) es un adaptador citoplasmático enriquecido en células inmunitarias que modula la señalización “inside-out” hacia las integrinas y favorece la adhesión, polarización y migración de los leucocitos. Al unirse a citoesina-1, CYTIP puede influir en el tráfico de membranas dependiente de la GTPasa ARF y en la remodelación del citoesqueleto de actina, conectando la señalización desencadenada por receptores con cambios en la motilidad celular y en la organización de la sinapsis inmunitaria. CYTIP está implicada en vías que regulan la activación de linfocitos T y la función de las células dendríticas, donde una expresión alterada puede modificar el reclutamiento de células inmunitarias y las respuestas efectoras. La desregulación de la señalización asociada a CYTIP se ha estudiado en el contexto de procesos inflamatorios y de interacciones tumor-inmunidad, lo que la hace relevante para la inmunología mecanística y la investigación del microambiente tumoral en cáncer.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO CYTIP (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CYTIP en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CYTIP junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CYTIP tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CYTIP.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CYTIP para la investigación de la señalización de CYTIP, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de CYTIP críticos para la función de CYTIP
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CYTIP para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido CYTIP CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido CYTIP CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CYTIP. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CYTIP (h) y el plásmido HDR CYTIP (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CYTIP para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CYTIP definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.