Date published: 2026-7-23

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Plasmide Double Nickase (h) cystatin S: sc-416501-NIC

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Fiches techniques
  • Espèces cibles: human
  • 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
  • Le Plasmide Double Nickase (h) cystatin S correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
  • Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
  • L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
  • Le plasmide cystatin S Double Nickase (h) et le plasmide cystatin S Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CST4. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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    Plasmide Double Nickase (h) cystatin S

    sc-416501-NIC
    20 µg
    $410.00

    Plasmide Double Nickase (h2) cystatin S

    sc-416501-NIC-2
    20 µg
    $410.00

    CST4 code la cystatine S, une cystatine de type 2 sécrétée qui agit comme inhibiteur réversible des protéases à cystéine de type papaïne, contribuant à l’équilibre de la protéolyse dans les environnements extracellulaires et muqueux. En modulant l’activité des cathepsines, la cystatine S participe à l’homéostasie protéase–antiprotéase, qui influence le maintien de la barrière épithéliale, la défense antimicrobienne et la signalisation inflammatoire. Des altérations de la dynamique cystatine/cathepsine ont été associées à un remodelage tissulaire et à des réponses immunitaires dysrégulés dans des affections touchant la biologie de la cavité orale et des voies aérodigestives supérieures. CST4 est donc étudié dans des voies reliant le contrôle des protéases sécrétées à l’immunité muqueuse et aux réponses épithéliales au stress.

    cystatin S Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CST4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CST4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CST4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

    Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CST4.

    Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.