Partículas Lentivirales de Activación (m) CYPOR: sc-422345-LAC

El gen **Por** de ratón codifica la **citocromo P450 oxidorreductasa (CYPOR)**, el donador obligado de electrones para las enzimas microsomales del citocromo P450 que catalizan el metabolismo oxidativo de xenobióticos, esteroides, ácidos grasos y retinoides. La CYPOR transfiere equivalentes reductores desde el NADPH a los CYP, conectando el equilibrio redox celular con las vías de desintoxicación asociadas al retículo endoplásmico y con la homeostasis lipídica. Al regular las reacciones de bioactivación y depuración dependientes de CYP, **Por** influye en las respuestas al estrés oxidativo y en la capacidad metabólica específica de cada tejido en el hígado y en órganos extrahepáticos. Por ello, la actividad desregulada de la CYPOR es relevante para estudios de interacciones fármaco–fármaco, alteraciones de la señalización endocrina y lipídica, y fenotipos metabólicos asociados con cambios en la función de los CYP.

Las partículas de activación lentiviral CYPOR (m) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de Por en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral CYPOR (m) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción Por, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de CYPOR. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo Por y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.