Plasmide Double Nickase (h) CYP2J2: sc-402955-NIC

CYP2J2 code une époxygénase humaine du cytochrome P450 qui oxyde des lipides endogènes, notamment en convertissant l’acide arachidonique en acides époxyeicosatriénoïques (EET), des médiateurs bioactifs qui influencent le tonus vasculaire, la signalisation inflammatoire et les réponses cellulaires au stress. Par son activité de monooxygénase microsomale, CYP2J2 s’inscrit à l’interface du métabolisme des eicosanoïdes et des voies de l’homéostasie rédox, susceptibles de moduler la fonction endothéliale et la biologie des cellules musculaires lisses. Des altérations de l’expression ou de l’activité de CYP2J2 ont été étudiées dans le contexte de traits cardiométaboliques, d’états inflammatoires et de phénotypes de cellules tumorales, reflétant son rôle dans l’équilibre des médiateurs lipidiques et la signalisation cellulaire. En tant qu’enzyme impliquée dans le métabolisme des xénobiotiques, CYP2J2 contribue aussi à la biotransformation oxydative de certains composés, ce qui la rend pertinente pour la recherche en pharmacologie et en toxicologie.

CYP2J2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CYP2J2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CYP2J2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CYP2J2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CYP2J2.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.