Plásmido Doble Nickase (h) CYP2E1: sc-401357-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)CYP2E1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa CYP2E1 (h) y el plásmido de doble nickasa CYP2E1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CYP2E1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) CYP2E1 | sc-401357-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) CYP2E1 | sc-401357-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El citocromo P450 2E1 (CYP2E1) es una monooxigenasa microsomal que oxida pequeños sustratos orgánicos y contribuye al metabolismo de xenobióticos de fase I en el retículo endoplásmico. Participa en el ciclo redox y puede generar especies reactivas de oxígeno, lo que vincula la actividad de CYP2E1 con el estrés oxidativo, la peroxidación lipídica y la señalización inflamatoria posterior. CYP2E1 se integra en las vías de desintoxicación hepática e influye en las respuestas celulares al alcohol y a exposiciones químicas mediante el metabolismo de múltiples compuestos de bajo peso molecular. La expresión o actividad alteradas de CYP2E1 se han asociado con la susceptibilidad a lesión hepática inducida por tóxicos y con fenotipos de estrés metabólico, lo que lo convierte en una diana útil para estudios mecanísticos del procesamiento de xenobióticos.
CYP2E1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CYP2E1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CYP2E1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CYP2E1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CYP2E1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.