Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) CYP19: sc-400604-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)CYP19 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa CYP19 (h) y el plásmido de doble nickasa CYP19 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CYP19A1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CYP19 Anticuerpo (E-9): sc-374176
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) CYP19 | sc-400604-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) CYP19 | sc-400604-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CYP19A1 codifica la aromatasa (CYP19), una enzima microsómica del citocromo P450 que cataliza el paso final de la biosíntesis de estrógenos al convertir andrógenos en estrógenos. Esta actividad es fundamental para el metabolismo de las hormonas esteroideas y la señalización endocrina, ya que moldea programas transcripcionales a través de las vías del receptor de estrógenos e influye en la homeostasis del desarrollo y específica de los tejidos. La expresión de CYP19A1 está estrechamente regulada en contextos gonadales, adiposos, óseos y cerebrales, vinculando la producción local de estrógenos con la proliferación celular, la diferenciación y la regulación metabólica. La actividad desregulada de la aromatasa se ha asociado con fisiopatología dependiente de hormonas, incluyendo un equilibrio estrógeno/andrógeno alterado y señalización aberrante en la biología reproductiva y mamaria.
CYP19 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CYP19A1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CYP19A1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CYP19A1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CYP19A1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.