Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Plásmido Doble Nickase (h) cyclin D2: sc-401236-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)cyclin D2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa cyclin D2 (h) y el plásmido de doble nickasa cyclin D2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CCND2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: cyclin D2 Anticuerpo (B-6): sc-376676
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) cyclin D2 | sc-401236-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) cyclin D2 | sc-401236-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CCND2 codifica la ciclina D2, un socio regulador de CDK4/6 que impulsa la progresión de la fase G1 al promover la fosforilación de la proteína del retinoblastoma y la transcripción dependiente de E2F. La ciclina D2 integra señales mitogénicas de vías como PI3K–AKT y RAS–MAPK para coordinar la entrada en el ciclo celular, la proliferación y programas de diferenciación dependientes del contexto. Las alteraciones en la dosis o en el control de CCND2 pueden perturbar los puntos de control G1/S, influyendo en la estabilidad del genoma y en la capacidad proliferativa. La desregulación de la señalización de la ciclina D2 se ha vinculado a fenotipos de crecimiento aberrante y se estudia en biología del cáncer, trastornos del desarrollo y modelos de linajes endocrinos y neuronales en los que el control del eje CDK4/6–RB es crucial.
cyclin D2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CCND2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CCND2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CCND2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CCND2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.