CXXC5 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-403248-NIC

CXXC5(CXXC형 아연 손가락 단백질 5)는 CpG가 풍부한 DNA에 결합하고 염색질 관련 복합체들과 상호작용하여 전사 프로그램을 조절하는 핵 및 세포질 조절인자입니다. CXXC5는 Dishevelled와의 상호작용을 통해 정형(canonical) Wnt/β-카테닌 신호전달의 피드백 억제자로 기능하며, 그 결과 세포 운명 결정, 증식, 분화에 영향을 미칩니다. 또한 CXXC5는 스트레스 반응성 경로 및 세포 정체성 프로그램의 조절과도 연관되어 있어, 발생생물학과 조직 항상성 연구에서 중요한 표적으로 여겨집니다. CXXC5 발현 또는 신호전달의 이상 조절은 암 및 기타 증식성 질환에서 관찰되는 Wnt 경로 출력의 변화와 관련되어 있으며, 경로 중심 연구에서 기전적 핵심 노드로 활용될 근거를 제공합니다.

CXXC5 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 CXXC5 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 CXXC5 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 CXXC5의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.

편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, CXXC5 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.