Plásmido Doble Nickase (h) CXCR-7: sc-403187-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)CXCR-7 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa CXCR-7 (h) y el plásmido de doble nickasa CXCR-7 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ACKR3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) CXCR-7 | sc-403187-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) CXCR-7 | sc-403187-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ACKR3 codifica el receptor atípico de quimiocinas CXCR-7, un receptor captador tipo GPCR de siete dominios transmembrana que se une a CXCL12 y CXCL11 y modula la disponibilidad de quimiocinas más que la señalización clásica mediada por Gαi. Al moldear gradientes de CXCL12 y establecer interacciones funcionales con CXCR4, CXCR-7 influye en la quimiotaxis, los programas de supervivencia celular, la biología endotelial y la migración celular durante el desarrollo, con efectos aguas abajo sobre vías como ERK/MAPK y la señalización sesgada hacia β-arrestina. La actividad alterada de ACKR3/CXCR-7 se ha asociado con un tráfico leucocitario desregulado, microambientes inflamatorios, remodelado vascular y la migración y metástasis de células tumorales, lo que lo convierte en un nodo frecuentemente estudiado en la biología de redes de quimiocinas.
CXCR-7 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ACKR3 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ACKR3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ACKR3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ACKR3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.