Plásmido Doble Nickase (h) CXCL16: sc-405248-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)CXCL16 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa CXCL16 (h) y el plásmido de doble nickasa CXCL16 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CXCL16. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CXCL16 Anticuerpo (C-5): sc-514363
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) CXCL16 | sc-405248-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) CXCL16 | sc-405248-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CXCL16 codifica una quimiocina transmembrana que puede liberarse por escisión proteolítica para generar un ligando soluble de CXCR6, coordinando la quimiotaxis y la retención de linfocitos T activados, células NK y otros subgrupos de leucocitos. A través de la señalización dependiente de CXCR6, CXCL16 contribuye al tráfico leucocitario, la adhesión y el diálogo inflamatorio dentro de los tejidos, vinculando los gradientes de quimiocinas con la vigilancia inmunitaria y la remodelación tisular. La forma unida a membrana también actúa como receptor “scavenger” para lípidos oxidados y restos apoptóticos, conectando el reconocimiento inmunitario innato con vías de señalización inflamatoria. La actividad desregulada del eje CXCL16/CXCR6 se ha asociado con afecciones inflamatorias crónicas, procesos relacionados con la aterosclerosis y la dinámica del microambiente inmunitario tumoral, lo que lo convierte en un objetivo relevante para estudios mecanísticos de inmunopatología.
CXCL16 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CXCL16 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CXCL16. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CXCL16. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CXCL16 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.