CTHRC1 Double Nickase Plasmid (m2): sc-427107-NIC-2
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das CTHRC1 Double Nickase Plasmid (m2) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- CTHRC1 Double-Nickase-Plasmid (m2) und CTHRC1 Double-Nickase-Plasmid (m22) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Cthrc1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
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| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
CTHRC1 Double Nickase Plasmid (m2) | sc-427107-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Das Mausgen *Cthrc1* kodiert CTHRC1, ein sezerniertes, mit der extrazellulären Matrix assoziiertes Protein, das den Gewebeumbau moduliert, indem es die Kollageneinlagerung und die Zell–Matrix-Interaktionen beeinflusst. CTHRC1 wird häufig mit der Regulation nicht-kanonischer und kanonischer Wnt-Signalwege in Verbindung gebracht und wirkt sich dadurch auf Zellmigration, Adhäsionsdynamik sowie vaskuläre oder stromale Reaktionen während Entwicklung und Reparatur aus. Eine veränderte *Cthrc1*-Expression wurde mit fibrotischem Remodeling und Veränderungen des tumorassoziierten Mikromilieus in Zusammenhang gebracht, was es zu einem nützlichen Ziel macht, um Mechanismen von Invasion, metastasenförderndem Stroma und pathologischem Matrixumsatz zu untersuchen. Das Gene Editing von *Cthrc1* in Mausmodellen oder kultivierten Zellen ermöglicht funktionelle Studien zur Signalgebung der extrazellulären Matrix, zu wundheilungsähnlichen Programmen und zum Crosstalk von Signalwegen in Kontexten entzündungsgetriebenen Remodelings.
CTHRC1 Das Double-Nickase-Plasmid (m2) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Cthrc1-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Cthrc1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Cthrc1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Cthrc1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.