Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
CtBP2 Double Nickase Plasmid (m): sc-419868-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das CtBP2 Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- CtBP2 Double-Nickase-Plasmid (m) und CtBP2 Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Ctbp2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
CtBP2 Double Nickase Plasmid (m) | sc-419868-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CtBP2 Double Nickase Plasmid (m2) | sc-419868-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Mouse Ctbp2 kodiert das C-terminal bindende Protein 2 (CtBP2), einen NADH-sensitiven transkriptionellen Koregulator, der den zellulären Stoffwechselzustand mit Chromatin-Remodeling und Genexpression verknüpft. CtBP2 assoziiert mit DNA-bindenden Transkriptionsfaktoren und Korepressor-Komplexen, um Histondeacetylierung und andere epigenetische Mechanismen zu modulieren, die Differenzierung, Zellzyklusprogramme und stressresponsive Transkription steuern. Durch die Regulation von Signalwegen wie Wnt/β-Catenin, TGF-β und Notch-assoziierten Transkriptionsausgängen beeinflusst CtBP2 die epithelial–mesenchymale Transition, die neuronale Entwicklung und synaptische Gen-Netzwerke. Eine dysregulierte CTBP2-Aktivität und ein verändertes Korepressor-Gleichgewicht wurden mit krankheitsrelevanten Phänotypen in Verbindung gebracht, darunter Tumorprogression, neuroentwicklungsbedingte Defekte und metabolische Anpassung in proliferierenden Zellen.
CtBP2 Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Ctbp2-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Ctbp2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Ctbp2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Ctbp2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.