Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
CSN8 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-430844-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CSN8O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CSN8 (m) e o Plasmídeo Double Nickase CSN8 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Cops8. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CSN8 Anticorpo (C-9): sc-514088
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CSN8 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-430844-NIC | 20 µg | $410.00 |
Cops8 codifica a CSN8, uma subunidade central do signalossoma COP9 que regula a atividade das ligases de ubiquitina do tipo cullin–RING por meio da desnedilação, moldando assim a degradação de proteínas dependente de ubiquitina. Ao controlar a estabilidade de reguladores do ciclo celular, fatores de resposta a danos no DNA e intermediários de sinalização, a CSN8 ajuda a coordenar a proteostase, respostas ao estresse e programas transcricionais. Em sistemas murinos, a disrupção da função do signalossoma COP9 tem sido associada a alterações na homeostase do desenvolvimento e a defeitos específicos de tecidos, refletindo impactos amplos sobre proliferação e apoptose. Esses papéis tornam Cops8 um ponto de interesse para estudar a comunicação cruzada entre a via ubiquitina–proteassoma e redes de sinalização como MAPK e NF-κB.
CSN8 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Cops8 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Cops8. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Cops8. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Cops8 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.