Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide Double Nickase (m) CSN8: sc-430844-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) CSN8 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CSN8 Double Nickase (m) et le plasmide CSN8 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Cops8. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CSN8 Antibody (C-9): sc-514088
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) CSN8 | sc-430844-NIC | 20 µg | $410.00 |
Cops8 code pour CSN8, une sous-unité centrale du signalosome COP9 qui régule l’activité des ligases ubiquitine culline–RING via la déneddylation, façonnant ainsi le renouvellement des protéines dépendant de l’ubiquitine. En contrôlant la stabilité des régulateurs du cycle cellulaire, des facteurs de réponse aux dommages de l’ADN et des intermédiaires de signalisation, CSN8 contribue à coordonner la protéostasie, les réponses au stress et les programmes transcriptionnels. Dans les modèles murins, l’altération de la fonction du signalosome COP9 a été associée à des perturbations de l’homéostasie du développement et à des défauts spécifiques à certains tissus, reflétant des effets étendus sur la prolifération et l’apoptose. Ces fonctions font de Cops8 un nœud d’étude utile pour analyser la communication entre la voie ubiquitine–protéasome et des réseaux de signalisation tels que MAPK et NF-κB.
CSN8 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Cops8 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Cops8. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Cops8. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Cops8.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.