CSN8 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-409800

Übersicht

COPS8 kodiert CSN8, eine zentrale Untereinheit des COP9-Signalosoms, das die Proteinhomöostase reguliert, indem es die Deneddylierung von Cullin‑RING‑Ubiquitin-Ligasen katalysiert. Über diese Aktivität stimmt CSN8 den ubiquitinabhängigen Abbau wichtiger Zellzyklusregulatoren, Transkriptionsfaktoren und Stressantwort-Proteine fein ab und beeinflusst damit Prozesse wie die DNA-Schadenssignalgebung, das Gleichgewicht zwischen Autophagie und Proteasom sowie die Apoptose. Die Funktion von CSN8 ist in umfassendere Ubiquitin‑Proteasom- und Neddylierungswege eingebettet, die Signaltransduktion und Entwicklungsprogramme steuern. Eine Fehlregulation von Komponenten des COP9-Signalosoms, einschließlich CSN8, wurde mit veränderter proliferativer Signalgebung und zellulärer Stressanpassung in Verbindung gebracht, was für die Krebsbiologie und neurodegenerative Phänotypen relevant ist.

Das CSN8 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des COPS8-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des COPS8-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von COPS8 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die CSN8-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von COPS8-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der CSN8-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf COPS8-Exone abzielen, die für die CSN8-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere COPS8-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom CSN8 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom CSN8 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des COPS8-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das CSN8 HDR-Plasmid (h) und CSN8 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von COPS8-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten COPS8-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.