CSH1 Double Nickaseプラスミド (h): sc-401213-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- CSH1 Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- CSH1ダブルニカースプラスミド（h）およびCSH1ダブルニカースプラスミド（h2）は、CSH1を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
CSH1 Double Nickaseプラスミド (h) | sc-401213-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CSH1 Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-401213-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CSH1は、絨毛性ソマトマンモトロピンホルモン1（胎盤ラクトゲン）をコードする遺伝子で、ヒト胎盤の合胞体栄養膜（syncytiotrophoblast）で主に産生され、分泌されるペプチドホルモンです。CSH1は、プロラクチン／成長ホルモン受容体ファミリーの活性に関連するシグナル伝達経路を介して、妊娠中のインスリン感受性、脂質動員、栄養分配を調節し、母体―胎児間の代謝適応に寄与します。その発現は栄養膜の分化、胎盤の内分泌機能、ならびに胎児成長の推移の制御と密接に関連しています。CSH1発現の異常は、胎盤機能不全の表現型や、胎児発育の変化および代謝合併症を含む妊娠関連疾患と関連づけられており、胎盤発生や内分泌シグナル伝達の研究において重要です。
CSH1 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における CSH1 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、CSH1内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、CSH1の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、CSH1が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。