cryptdin 25 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-419983

개요

Defa25는 cryptdin 25를 암호화하는 유전자로, cryptdin 25는 마우스 파네트(Paneth) 세포 유래의 α-디펜신이며 장관 내강에서 광범위한 항균 활성을 발휘함으로써 점막 표면의 선천면역에 기여합니다. 분비성 양이온성 펩타이드로서 cryptdin 25는 숙주–미생물군 상호작용을 조절하고 상피 장벽 항상성을 유지하는 데 도움을 주며, 항균 효과기 기능을 염증성 신호전달 및 미생물 감지 경로와 연결합니다. 디펜신 발현 변화와 파네트 세포 기능장애는 장내 미생물 불균형과 만성 염증 상태의 맥락에서 자주 연구되며, 항균 펩타이드 프로파일의 변화는 장내 감염 및 점막 염증에 대한 감수성에 영향을 줄 수 있습니다. 따라서 Defa25는 장 면역, 상피–미생물 간 크로스토크, 그리고 장 크립트 내 계통 특이적 분비 프로그램에 대한 기전 연구에 중요합니다.

cryptdin 25 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Defa25 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Defa25 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Defa25의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 cryptdin 25 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 cryptdin 25 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Defa25 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• cryptdin 25 기능에 중요한 Defa25 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Defa25 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• cryptdin 25 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 cryptdin 25 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Defa25 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  cryptdin 25 HDR 플라스미드 (m) 및 cryptdin 25 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Defa25 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Defa25 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.