Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
CRX Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419817
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- CRX El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico CRX, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CRX Anticuerpo (A-9): sc-377138
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
CRX Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419817 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Crx codifica el factor de transcripción homeobox de conos y bastones (CRX), un regulador maestro de la diferenciación y el mantenimiento de los fotorreceptores en la retina del ratón. CRX se une a elementos reguladores en cis para impulsar la expresión de genes necesarios para la fototransducción, la biogénesis del segmento externo y la función sináptica, integrando redes transcripcionales con otros factores del linaje retinal. La alteración de los programas génicos dependientes de CRX perjudica la maduración y la supervivencia de bastones y conos, vinculando esta vía con fenotipos de degeneración retiniana hereditaria. En consecuencia, Crx se estudia ampliamente para comprender los mecanismos del desarrollo retiniano, la regulación génica de los fotorreceptores y las relaciones genotipo–fenotipo en modelos de enfermedades del sistema visual.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO CRX (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Crx en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Crx junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Crx tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CRX.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Crx para la investigación de la señalización de CRX, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Crx críticos para la función de CRX
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Crx para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido CRX CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido CRX CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Crx. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CRX (m) y el plásmido HDR CRX (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Crx para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Crx definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.