Plásmido Doble Nickase (h) CROP: sc-412243-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)CROP consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa CROP (h) y el plásmido de doble nickasa CROP (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a LUC7L3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) CROP | sc-412243-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) CROP | sc-412243-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LUC7L3 codifica CROP, una proteína de unión a ARN relacionada con las SR que contribuye al ensamblaje del espliceosoma y a la fidelidad del empalme del pre-ARNm. CROP participa en el procesamiento del ARN durante y después de la transcripción, influyendo en el uso alternativo de exones y en la estabilidad de los transcritos en vías vinculadas al control del ciclo celular, las respuestas al estrés y la diferenciación. Los programas de empalme desregulados en los que participa LUC7L3 se han asociado con redes de expresión génica alteradas observadas en múltiples contextos relevantes para la enfermedad, incluida la biología del cáncer y la señalización inflamatoria. Como factor de empalme humano, CROP se estudia a menudo para comprender cómo las perturbaciones en el procesamiento del ARN remodelan la salida del proteoma y los fenotipos celulares.
CROP El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus LUC7L3 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de LUC7L3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de LUC7L3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con LUC7L3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.