CREB3L1CRISPR激活质粒(h): sc-405316-ACT
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- CREB3L1 CRISPER激活质粒（h）是一种协同激活介质（SAM）转录激活系统，目的在于特定上调基因表达
- CREB3L1 CRISPR 激活质粒 (h)包含三种质量比为1:1:1的质粒：一种质粒编码与转录激活结构域VP64融合的去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A)，和杀稻瘟素抗性基因；一种质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白，和潮霉素抗性基因；一种质粒编码与两个MS2 RNA适体融合的目标特异的20 nt向导RNA，和嘌呤霉素抗性基因。
- 形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域，为高效激活基因提供转录因子的招募
- 由 CREB3L1 CRISPR 激活质粒 (h) 和 CREB3L1 CRISPR 激活质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别针对 CREB3L1 转录起始位点上游的不同调控区域。其中一种或两种设计可能可用
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：CREB3L1: sc-514635，通过WB, IF或者IHC分析
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CREB3L1CRISPR激活质粒(h) | sc-405316-ACT | 20 µg | $397.00 |
CREB3L1（cAMP 反应元件结合蛋白 3 样 1）是一种膜锚定的 bZIP 转录因子，可通过受调控的膜内蛋白水解被激活，并转位进入细胞核，从而调控与内质网应激及分泌通路适应相关的基因表达程序。它会影响细胞外基质的生成以及与分化相关的转录网络，整合多种信号以协调胶原蛋白生物合成、细胞应激反应与蛋白质稳态（proteostasis）。在组织重塑异常和细胞状态转变等情境中，CREB3L1 的活性已被证明与之相关，因此对解析类纤维化转录程序的机制以及肿瘤相关的侵袭、转移与应激耐受性变化具有研究意义。作为转录调控因子，它为剖析内质网应激信号如何与基质重塑及谱系特异性基因表达相交汇提供了一个易于操控的关键节点。
CREB3L1 CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性CREB3L1的表达。
CREB3L1 CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的CREB3L1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于CREB3L1转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性CREB3L1表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的CREB3L1位点，并能够研究内源性位点上依赖于CREB3L1的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在CREB3L1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟CREB3L1通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。