Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) creatine kinase-B: sc-401868-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)creatine kinase-B consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa creatine kinase-B (h) y el plásmido de doble nickasa creatine kinase-B (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CKB. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: creatine kinase-B Anticuerpo (B-9): sc-373686
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) creatine kinase-B | sc-401868-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) creatine kinase-B | sc-401868-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CKB codifica la creatina quinasa B, una fosfotransferasa citosólica que cataliza la transferencia reversible de fosfato entre el ATP y la creatina para amortiguar la carga energética celular. Como componente clave de la lanzadera de fosfocreatina, CKB favorece la rápida regeneración de ATP y acopla la demanda energética a la glucólisis y a la fosforilación oxidativa, especialmente en tejidos excitables y metabólicamente activos. La actividad de la creatina quinasa B influye en procesos como la dinámica del citoesqueleto, el transporte iónico de membrana y la función sináptica mediante el control local de la disponibilidad de ATP. La alteración de la expresión o de la actividad de CKB se ha asociado con fenotipos de estrés metabólico y se investiga con frecuencia en contextos de neurobiología y de bioenergética de células tumorales.
creatine kinase-B El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CKB en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CKB. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CKB. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CKB alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.