Plásmido Doble Nickase (h) CR1L: sc-405453-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)CR1L consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa CR1L (h) y el plásmido de doble nickasa CR1L (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CR1L. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) CR1L | sc-405453-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) CR1L | sc-405453-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El receptor del complemento 1 similar (CR1L) es un gen humano anotado como un miembro relacionado con los receptores del complemento dentro de la familia de reguladores de la activación del complemento, y comparte características estructurales con CR1 que participan en la opsonización y el manejo de complejos inmunes. Por analogía con CR1, CR1L es relevante para procesos vinculados al control de la cascada del complemento, la vigilancia inmunitaria innata y el crosstalk entre la señalización del complemento y respuestas celulares como la fagocitosis y la modulación de la inflamación. La variación en las redes reguladoras del complemento se asocia ampliamente con la desregulación inmunitaria y el daño tisular inflamatorio, lo que convierte a CR1L en un locus útil para estudios mecanísticos de fenotipos asociados al complemento. La investigación experimental de CR1L respalda el estudio de vías impulsadas por el complemento, la función de dominios tipo receptor y las relaciones genotipo–fenotipo en modelos celulares relevantes para el sistema inmunitario.
CR1L El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CR1L en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CR1L. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CR1L. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CR1L alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.