Plasmide Double Nickase (h) CR1L: sc-405453-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CR1L correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CR1L Double Nickase (h) et le plasmide CR1L Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CR1L. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CR1L | sc-405453-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CR1L | sc-405453-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le récepteur du complément 1 de type (CR1L) est un gène humain annoté comme un membre apparenté aux récepteurs du complément de la famille des régulateurs de l’activation du complément, partageant des caractéristiques structurales avec CR1 qui participent à l’opsonisation et à la gestion des complexes immuns. Par analogie avec CR1, CR1L est pertinent pour des processus liés au contrôle de la cascade du complément, à la surveillance immunitaire innée et au dialogue entre la signalisation du complément et des réponses cellulaires telles que la phagocytose et la modulation de l’inflammation. Les variations des réseaux de régulation du complément sont largement associées à une dérégulation immunitaire et à des lésions tissulaires inflammatoires, ce qui fait de CR1L un locus utile pour des études mécanistiques de phénotypes associés au complément. L’étude expérimentale de CR1L soutient la recherche sur les voies dépendantes du complément, la fonction de domaines de type récepteur et les relations génotype–phénotype dans des modèles cellulaires pertinents pour l’immunité.
CR1L Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CR1L dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CR1L. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CR1L. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CR1L.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.