Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Plásmido Doble Nickase (h) Cosmc: sc-409904-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Cosmc consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Cosmc (h) y el plásmido de doble nickasa Cosmc (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a C1GALT1C1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Cosmc Anticuerpo (H-10): sc-271829
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Cosmc | sc-409904-NIC | 20 µg | $410.00 |
C1GALT1C1 codifica Cosmc, una chaperona molecular residente del retículo endoplásmico necesaria para el plegamiento y la estabilidad de la β1,3-galactosiltransferasa del core 1 (C1GALT1), lo que permite la biosíntesis de O‑glicanos de core 1. Al sostener la O‑glicosilación de tipo mucina, Cosmc influye en el tráfico de proteínas, las interacciones célula–célula y la señalización mediada por lectinas que dependen de estructuras de O‑glicanos correctamente elaboradas. La pérdida o disfunción de Cosmc altera la extensión de los O‑glicanos y favorece la acumulación de O‑glicanos truncados, como los antígenos Tn y sialil‑Tn, modificando el glicoproteoma y el comportamiento de los receptores de superficie. Los patrones aberrantes de O‑glicosilación asociados a Cosmc se han vinculado a cambios en el reconocimiento inmunitario y a contextos de transformación maligna, lo que convierte a C1GALT1C1 en un objetivo útil para estudios mecanísticos de glicobiología.
Cosmc El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus C1GALT1C1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de C1GALT1C1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de C1GALT1C1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con C1GALT1C1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.