Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) Cortactin: sc-400761-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Cortactin correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Cortactin Double Nickase (h) et le plasmide Cortactin Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CTTN. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Cortactin Antibody (H-5): sc-55579
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Cortactin | sc-400761-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Cortactin | sc-400761-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CTTN code la cortactine, une protéine d’échafaudage se liant à l’actine qui coordonne la ramification de l’actine dépendante d’Arp2/3 et stabilise les réseaux dynamiques d’actine corticale. En reliant l’assemblage des filaments à des modules de signalisation, la cortactine favorise la formation des lamellipodes, l’endocytose et la maturation des invadopodes, en intégrant des signaux provenant des kinases de la famille Src et des voies des GTPases Rho pour réguler l’adhésion et la motilité. Des altérations du dosage de CTTN ou de son état de phosphorylation ont été associées à un remodelage cytosquelettique dérégulé et à des phénotypes invasifs, ce qui en fait une cible pertinente pour l’étude de la migration des cellules tumorales et des voies de signalisation associées aux métastases. La cortactine contribue également au trafic membranaire et au renouvellement des récepteurs, reliant la dynamique de l’actine aux sorties de signalisation des facteurs de croissance.
Cortactin Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CTTN dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CTTN. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CTTN. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CTTN.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.