Contactin 3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422111

Descripción general

Cntn3 codifica contactina 3, una molécula de adhesión celular de la superfamilia de las inmunoglobulinas anclada a GPI, enriquecida en el sistema nervioso, que favorece el crecimiento de neuritas, la guía axonal y la organización de las sinapsis. La contactina 3 participa en interacciones de la familia contactina–L1 y con receptores en la superficie neuronal, moldeando el reconocimiento célula–célula y el ensamblaje de circuitos durante el desarrollo y la maduración. A través de funciones en la señalización dependiente de adhesión y en la organización de microdominios de membrana, CNTN3 influye en programas de conectividad y plasticidad relevantes para fenotipos del neurodesarrollo y neuropsiquiátricos. Por ello, Cntn3 en ratón es un punto de partida útil para diseccionar determinantes moleculares de la especificidad del cableado y la remodelación de redes dependiente de la actividad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Contactin 3 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Cntn3 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Cntn3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Cntn3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Contactin 3.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Cntn3 para la investigación de la señalización de Contactin 3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Cntn3 críticos para la función de Contactin 3
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Cntn3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Contactin 3 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Contactin 3 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Cntn3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Contactin 3 (m) y el plásmido HDR Contactin 3 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Cntn3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Cntn3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.