connexin 46 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403947-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- connexin 46O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase connexin 46 (h) e o Plasmídeo Double Nickase connexin 46 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GJA3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:connexin 46 Anticorpo (C-3): sc-365394
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
connexin 46 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403947-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
connexin 46 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403947-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GJA3 codifica a conexina 46, uma proteína de junções comunicantes enriquecida no cristalino que se monta em hemicanais e canais intercelulares para mediar a transferência direta, de célula para célula, de íons e pequenos metabólitos. A conexina 46 sustenta a diferenciação e a homeostase das células das fibras do cristalino ao contribuir para o sistema de microcirculação do cristalino, coordenar o equilíbrio redox e manter o equilíbrio iônico e osmótico. Por meio da regulação da comunicação juncional e da permeabilidade dos hemicanais, influencia o manejo de cálcio, a sinalização por ATP e as respostas ao estresse celular em tecido ocular avascular. A disrupção da função de GJA3 está associada a fenótipos hereditários de catarata, tornando-o um alvo relevante para estudar os mecanismos de transparência do cristalino e o controle de qualidade proteica no ambiente ocular.
connexin 46 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GJA3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GJA3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GJA3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GJA3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.