Complexin-2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406799

Descripción general

CPLX2 codifica la complexina-2, una proteína citosólica presináptica que se une a complejos SNARE ensamblados para regular el cebado (priming) de las vesículas sinápticas y la exocitosis desencadenada por calcio. Al modular la probabilidad de fusión vesicular y la liberación sincrónica de neurotransmisores, la complexina-2 contribuye a la neurotransmisión dependiente de la actividad y a la plasticidad sináptica a corto plazo. La disfunción vinculada a CPLX2 se ha investigado en el contexto de alteraciones del equilibrio excitación/inhibición y de fenotipos a nivel de circuitos relevantes para trastornos neuropsiquiátricos y del neurodesarrollo, así como de cambios sinápticos asociados a la neurodegeneración. Estas características hacen de CPLX2 un nodo útil para analizar la fusión de membranas mediada por SNARE, la señalización dependiente de Ca2+ y el control del ciclo de vesículas presinápticas en modelos celulares humanos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Complexin-2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CPLX2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CPLX2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CPLX2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Complexin-2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CPLX2 para la investigación de la señalización de Complexin-2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de CPLX2 críticos para la función de Complexin-2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CPLX2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Complexin-2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Complexin-2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CPLX2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Complexin-2 (h) y el plásmido HDR Complexin-2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CPLX2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CPLX2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.