Plásmido Doble Nickase (h) COL15A1: sc-404027-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)COL15A1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa COL15A1 (h) y el plásmido de doble nickasa COL15A1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a COL15A1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) COL15A1 | sc-404027-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) COL15A1 | sc-404027-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
COL15A1 codifica la cadena alfa 1 del colágeno tipo XV, un colágeno no fibrilar asociado a la membrana basal que contribuye a la organización de la matriz extracelular y a la estabilidad mecánica de nichos microvasculares y pericelulares. COL15A1 favorece la adhesión célula–matriz, regula la arquitectura tisular e influye en procesos como la angiogénesis y la remodelación del estroma mediante señalización ligada a integrinas y el ensamblaje de la membrana basal. La alteración de la expresión de COL15A1 y de la composición de la MEC se ha implicado en la remodelación asociada a la fibrosis y en la biología del microambiente tumoral, donde las redes de colágeno pueden modular la invasión, la integridad vascular y la migración celular. Como componente de la matriz con expresión dependiente del contexto, COL15A1 se utiliza con frecuencia para estudiar la comunicación cruzada entre MEC y células y la regulación dependiente del nicho de los fenotipos epiteliales y endoteliales.
COL15A1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus COL15A1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de COL15A1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de COL15A1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con COL15A1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.