COG7 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-409352

Descripción general

COG7 codifica una subunidad central del complejo de anclaje del Golgi oligomérico conservado (COG), que favorece el tráfico retrógrado de vesículas dentro del Golgi necesario para mantener la arquitectura del Golgi y la localización de enzimas. Al coordinar la captura y la fusión de vesículas con las membranas del Golgi, COG7 ayuda a garantizar el procesamiento y la clasificación adecuados de proteínas secretoras y de membrana, incluidas etapas de maduración dependientes de la glicosilación. La alteración de la función de COG7 perturba la homeostasis del Golgi y puede causar defectos amplios en la glicosilación y el tráfico de proteínas, procesos clave para la regulación de receptores de la superficie celular, la secreción y la comunicación entre orgánulos. Se han asociado variantes en COG7 con trastornos congénitos de la glicosilación, lo que resalta la relevancia del gen para estudiar la biosíntesis de glicoproteínas y los mecanismos de enfermedad relacionados con el Golgi.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO COG7 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen COG7 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del COG7 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de COG7 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína COG7.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en COG7 para la investigación de la señalización de COG7, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de COG7 críticos para la función de COG7
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de COG7 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido COG7 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido COG7 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus COG7. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR COG7 (h) y el plásmido HDR COG7 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología COG7 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana COG7 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.