CLIP4 Lentiviral Activation Particles (h): sc-413231-LAC

ヒトCLIP4（CAP-Glyドメイン含有リンカータンパク質4）は、微小管プラス端の動態との相互作用を介して、細胞骨格の構築と細胞内輸送の協調に関与すると考えられる微小管関連因子をコードします。微小管の安定性や、細胞極性・細胞分裂といった輸送依存的プロセスに影響を与えることで、CLIP4は細胞骨格リモデリングをシグナル伝達やオルガネラ配置と結び付ける経路にも作用し得ます。CLIPファミリーを含む微小管制御タンパク質の発現パターンの変化は、増殖状態やストレス適応状態にある細胞で報告されており、遊走、分裂の正確性、有糸分裂の忠実性、ゲノム安定性などの文脈でCLIP4を検討する意義が示唆されます。これらの生物学的特性により、CLIP4はヒト細胞における微小管依存的制御の機構研究に有用な標的となります。

CLIP4 レンチウイルス活性化粒子（h）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なCLIP4の発現上昇を可能にします。

CLIP4 レンチウイルス活性化粒子（h）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、CLIP4転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性CLIP4の発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のCLIP4ゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。