Plasmide CRISPR/Cas9 KO claudin-11 (h): sc-401859
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- claudin-11 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique claudin-11, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: claudin-11 Antibody (D-8): sc-271232
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO claudin-11 (h) | sc-401859 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
CLDN11 code la claudine-11, une protéine des jonctions serrées à quatre passages transmembranaires qui forme des barrières paracellulaires et régule la perméabilité sélective dans des épithéliums spécialisés. La claudine-11 est un composant clé de l’architecture des brins de jonctions serrées dans les cellules gliales myélinisantes et dans les jonctions des cellules de Sertoli du testicule, contribuant à la polarité cellulaire et à la compartimentation des tissus. Par les processus d’assemblage des jonctions serrées et de maintien de la barrière, CLDN11 influence l’intégrité épithéliale, l’homéostasie ionique et la signalisation d’adhésion cellule–cellule. Des altérations de l’expression de CLDN11 ou de l’organisation des jonctions sont étudiées dans des contextes de dysfonction de barrière et de différenciation dérégulée, avec un intérêt particulier pour la biologie de la myélinisation du système nerveux et l’homéostasie des tissus reproducteurs.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO claudin-11 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène CLDN11 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du CLDN11, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert CLDN11 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine claudin-11.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en CLDN11 pour l'étude de la signalisation de claudin-11, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de CLDN11 essentiels à la fonction de claudin-11
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de CLDN11 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le claudin-11 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le claudin-11 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus CLDN11. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le claudin-11 plasmide HDR (h) et le claudin-11 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie CLDN11 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles CLDN11 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.