CIDE-B Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403808

Descripción general

CIDEB codifica CIDE-B, un miembro de la familia de proteínas que contienen el dominio CIDE, implicada en la regulación de la dinámica de las gotas lipídicas, la homeostasis energética y procesos asociados a la muerte celular. En tejidos humanos con manejo activo de lípidos, CIDE-B contribuye a vías que conectan el almacenamiento y el recambio de lípidos neutros con la señalización metabólica, incluido el metabolismo lipídico hepático y programas asociados a adipocitos. La alteración de la expresión o la función de CIDEB se ha asociado con una acumulación lipídica desregulada y fenotipos metabólicos relevantes para mecanismos relacionados con la obesidad, la resistencia a la insulina y enfermedades vinculadas al hígado graso. En consecuencia, CIDEB se estudia por su papel en coordinar la biología de las gotas lipídicas con las respuestas al estrés y la función mitocondrial en células metabólicamente activas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO CIDE-B (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CIDEB en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CIDEB junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CIDEB tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CIDE-B.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CIDEB para la investigación de la señalización de CIDE-B, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de CIDEB críticos para la función de CIDE-B
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CIDEB para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido CIDE-B CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido CIDE-B CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CIDEB. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CIDE-B (h) y el plásmido HDR CIDE-B (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CIDEB para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CIDEB definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.