Plasmide Double Nickase (m) ChREBP: sc-425525-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) ChREBP correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ChREBP Double Nickase (m) et le plasmide ChREBP Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Mlxipl. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) ChREBP | sc-425525-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) ChREBP | sc-425525-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Mlxipl code pour la carbohydrate response element–binding protein (ChREBP), un facteur de transcription sensible au glucose qui coordonne la conversion des glucides en excès en lipides en induisant des gènes de la glycolyse et de la lipogenèse de novo. Dans des tissus murins tels que le foie et le tissu adipeux, ChREBP intègre le flux de glucides aux programmes de gènes métaboliques en aval du métabolisme du glucose et de la signalisation de l’insuline, influençant la synthèse des triglycérides, la zonation métabolique des hépatocytes et la fonction des adipocytes. Une activité de ChREBP dérégulée est associée à des phénotypes métaboliques incluant la stéatose hépatique, la résistance à l’insuline et des altérations de la gestion des lipides, faisant de Mlxipl un nœud clé pour l’étude du contrôle transcriptionnel induit par les nutriments. En tant que régulateur transcriptionnel, ChREBP constitue aussi un point d’entrée pratique pour examiner les interactions entre le métabolisme des glucides, la lipogenèse et les réponses au stress oxydatif.
ChREBP Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Mlxipl dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Mlxipl. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Mlxipl. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Mlxipl.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.