Plásmido Doble Nickase (m) ChREBP: sc-425525-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)ChREBP consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ChREBP (m) y el plásmido de doble nickasa ChREBP (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Mlxipl. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) ChREBP | sc-425525-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) ChREBP | sc-425525-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Mlxipl codifica la proteína de unión al elemento de respuesta a carbohidratos (ChREBP), un factor de transcripción sensible a la glucosa que coordina la conversión del exceso de carbohidratos en lípidos mediante la inducción de genes glucolíticos y lipogénicos de novo. En tejidos de ratón como el hígado y el tejido adiposo, ChREBP integra el flujo de carbohidratos con programas génicos metabólicos aguas abajo del metabolismo de la glucosa y de la señalización de la insulina, modulando la síntesis de triglicéridos, la zonación metabólica de los hepatocitos y la función de los adipocitos. La actividad desregulada de ChREBP se asocia con fenotipos metabólicos como la esteatosis hepática, la resistencia a la insulina y alteraciones en el manejo de lípidos, lo que convierte a Mlxipl en un nodo clave para estudiar el control transcripcional impulsado por nutrientes. Como regulador transcripcional, ChREBP también ofrece un punto de entrada accesible para investigar la comunicación cruzada entre el metabolismo de los carbohidratos, la lipogénesis y las respuestas al estrés oxidativo.
ChREBP El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Mlxipl en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Mlxipl. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Mlxipl. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Mlxipl alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.