Plásmido Doble Nickase (m) CEPT1: sc-430281-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)CEPT1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa CEPT1 (m) y el plásmido de doble nickasa CEPT1 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Cept1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) CEPT1 | sc-430281-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) CEPT1 | sc-430281-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen murino **Cept1** codifica la fosfotransferasa de colina/etanolamina 1 (CEPT1), una enzima de membrana del retículo endoplásmico que cataliza el paso final de la vía de Kennedy para generar fosfatidilcolina y fosfatidiletanolamina a partir de CDP-colina o CDP-etanolamina y diacilglicerol. Al controlar los principales reservorios de glicerofosfolípidos, CEPT1 sostiene la biogénesis de membranas, la homeostasis de los orgánulos y procesos de señalización dependientes de lípidos que influyen en la proliferación, la diferenciación y las respuestas celulares al estrés. La alteración de la síntesis y el remodelado de fosfolípidos es ampliamente relevante para la disfunción metabólica, la neurobiología y las transiciones oncogénicas del estado celular, lo que convierte a **Cept1** en un nodo útil para investigar fenotipos impulsados por lípidos en células de mamífero. La función de CEPT1 también está conectada con vías que regulan la integridad del RE y la capacidad secretora, vinculando la disponibilidad de lípidos con la proteostasis y el tráfico de membranas.
CEPT1 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Cept1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Cept1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Cept1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Cept1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.